(供四年制本科医学检验技术专业使用)

Ⅰ 前言

临床分子生物学检验技术是运用分子生物学技术分析疾病基因、从分子水平分析疾病发生的原因、跟踪疾病发展过程、检验感染人类的病原生物以及根据基因多态性指导个体化治疗的一门学科。通过实验课程的学习，加强实践技能培训，培养学生应用所学知识分析问题、解决问题的能力，为学生胜任临床工作打下良好的基础。通过实验课程的学习，临床分子生物学检验技术实验开展与理论教学相适应的验证性、综合性实验，实验内容力求与临床结合，做到举一反三，学以致用。

本大纲适用于四年制本科医学检验技术专业使用，现将大纲使用中有关问题说明如下：

一 为了使教师和学生更好地掌握教材,大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解，教学内容与教学要求对应，并统一标示(核心内容即知识点以下划实线，重点内容以下划虚线，一般内容不标示)便于学生重点学习。

二 教师在保证大纲核心内容的前提下，可根据不同教学手段，讲授重点内容和介绍一般内容。

三 总教学参考学时为20学时。

四 教材：1《分子诊断学实验指导》，科学出版社，黄韻祝，1版，2012年。

2《临床分子生物学检验技术补充实验指导》，自编。

Ⅱ 正文

实验一 全血基因组DNA的提取及琼脂糖凝胶电泳鉴定DNA片段

一 教学目的

通过对人全血基因组DNA的提取，掌握基因组DNA的提取原理和方法步骤；琼脂糖凝胶电泳的原理和操作

二 教学要求

（一）掌握基因组DNA的提取原理和方法步骤。

（二）掌握琼脂糖凝胶电泳的原理和操作。

（三）掌握琼脂糖凝胶电泳的结果分析

（四）熟悉分子生物学实验常用仪器的操作。

三 教学内容

（一）DNA的提取原理。

（二）提取基因组DNA的操作步骤。

（三）琼脂糖凝胶电泳的原理。

（四）琼脂糖凝胶电泳的操作步骤。

（五）电泳结果分析。

（六）分子生物学实验常用仪器介绍。

实验二 全血基因组RNA的制备与鉴定

一 教学目的

掌握全血基因组RNA Trizole法提取的原理和方法，应用紫外分光光度计法检测核酸浓度和纯度。

二 教学要求

（一）掌握Trizole法提取全血基因组RNA的原理和方法步骤。

（二）掌握紫外分光光度法检测核酸的浓度和纯度的原理和实验操作。

（三）熟悉用紫外吸收值的比值来估计核酸的纯度。

（四）熟悉真核细胞RNA提取前对原材料的预处理方法。

（五）了解RNA提取的其他方法。

三 教学内容

（一）Trizole法提取全血基因组RNA的原理。

（二）Trizole法提取全血基因组RNA的方法步骤。

（三）紫外分光光度法检测核酸的浓度和纯度的实验操作。

（四）紫外分光光度计法的结果分析。

（五）RNA提取的其他方法。

实验三 实时荧光定量PCR技术检测乙型肝炎病毒核酸

一 教学目的

通过对人血清中HBV的提取，掌握HBV-DNA实时荧光定量PCR的原理和基本步骤，能够独立分析实验结果。

二 教学要求

（一）掌握人血清中HBV-DNA的提取方法及原理。

（二）掌握实时荧光定量PCR测定原理和结果分析。

（三）熟悉HBV-DNA荧光定量PCR试剂组成、反应液配制及PCR反应条件。

（四）了解临床分子生物实验室的操作标准流程。

三 教学内容

（一）实时荧光定量PCR的测定原理。

（二）人血清中病毒DNA的提取方法和原理。

（三）HBV-DNA荧光定量PCR试剂组成、反应液配制及PCR反应条件。

（四）荧光定量PCR仪的操作步骤及结果分析。

（五）临床分子生物实验室的操作标准流程。

实验四 实时荧光定量PCR技术检测丙型肝炎病毒核酸

一 教学目的

通过对人血清中HCV的提取，掌握HCV-RNA实时荧光定量PCR的原理和基本步骤，能够独立分析实验结果。

二 教学要求

（一）掌握核酸纯化柱提法提取HCV-RNA的实验原理和操作步骤。

（二）掌握荧光定量RT-PCR检测HCV-RNA的结果分析。

（三）熟悉HCV-RNA荧光定量PCR试剂组成、反应液配制及PCR反应条件。

三 教学内容

（一）核酸纯化柱提法提取HCV-RNA的原理。

（二）人血清中HCV-RNA的提取操作步骤。

（三）HCV-RNA荧光定量PCR试剂组成、反应液配制及PCR反应条件。

（四）荧光定量PCR仪的操作步骤及结果分析。

实验五 导流杂交基因芯片技术进行人乳头瘤病毒分型

一 教学目的

掌握导流杂交基因芯片技术进行人乳头瘤病毒(HPV)分型检测的原理和实验操作，学会分析HPV分型结果。

二 教学要求

（一）掌握导流杂交基因芯片技术进行HPV分型检测的原理和操作步骤。

（二）掌握HPV分型的结果分析。

（三）熟悉导流杂交基因芯片技术。

三 教学内容

（一）导流杂交基因芯片技术。

（二）导流杂交基因芯片技术进行HPV分型检测的原理。

（三）导流杂交基因芯片技术进行HPV分型检测的操作步骤。

（四）HPV分型的结果分析。

Ⅲ 教学组织与方法

一 实施机构：由医学检验系临床生物化学教研室执行。

二 组织内容：教案讲义审核、集体教学备课、教学方法研究、教学手段应用。

三 教学方法：

1 实验教学：布置实验内容，课堂讲解和演示，以4人为1组，每组合作操作。

2 教学点：在分子生物学实验室教学。

3 辅导形式：课堂巡视和指导、讨论、复习等结合。

四 考核办法：实验报告占总评成绩的25%。

Ⅳ 教学时数分配表